Spirt ishlab chiqarish texnologiyasi
Yüklə 363,65 Kb. Pdf görüntüsü
|
|
7 – Laboratoriya ishi
PROTEOLITIK FAOLLIKNI ANIQLASH. Ishdan maqsad: Berilgan maxsulotlarda fermentlarni proteolitik aktivligini aniqlashni o‘rganish Kerakli asboblar Suv xammomi, termostat, 100 ml li kolba, probirkalar, pipetka. Reaktivlar: 0,1 m universal bufer eritmasi pH=2,3 0,5 M Na 2 CO 3 (Na karbonat) Ishlatiladigan Folin eritmasi 1% albumin eritmasi 0,1 m buferni ichida pH=2,3 Ferment eritmasi 2 mg/ml (mikrob achitqi proteaza). Fermentlar – bu tabiiy biologik oqsil katalizatorlar. Ular bioximik reaksiyalarni tezlashtirish xususiyatiga ega. Fermentlar juda katta axamiyatga ega, xar xil fermentativ protsesslarga asoslangan bo‘lib – sharobsozlik, spirt ishlab chiqarish sanoatida, organik kislotalar ishlab chiqarishda, vitamin, aminokislotalarda va boshqalarda qo‘llaniladi. Oqsilni gidroliz qiladigan fermentlar yoki polipeptidlar boshqa so‘z bilan ifodalaganimizda proteolitik fermentlar deyiladi. Aniqlash usuli: 2 ta probirka olamiz, ikkalasiga 1 ml 1% albumin eritmasidan 0,1 m bufer ichida pH=2 dan solib chiqamiz, xaroratni 30 °C atrofida ushlab turish uchun probirkalarni ultratermostatga joylashtiramiz, 5 daqiqadan so‘ng 1 probirkaga 1 ml ferment eritmasidan qo‘shamiz, aralashtiramiz va 10 daqiqa ichida shu xaroratda saqlaymiz, oqsil moddalarini va yuqori molekulyar gidroliz moddalarni cho‘ktirish 12 uchun 2 ml 0,3M TXK (trixlor uksusnaya kislota) kislotadan solamiz va ferment reaksiyasini to‘xtatamiz. Aralashmani shu xaroratda yana 20 daqiqa saqlaymiz, qog‘oz filtrdan o‘tkazamiz, filtratdan 1 ml olib 5 ml dan 0,5 M natriy karbonat eritmasidan qo‘shib aralashtiramiz va aralashtirishni to‘xtatmay 1 ml ishlatiladigan Folin reaktividan ertimaga qo‘shamiz. 20 daqiqadan keyin eritmalar och ko‘k rangga kiradi, optik zichlik intensivligini FEK da to‘lqin uzunligi 630 nm da kyuvetada (eni 10 mm) o‘lchaymiz (kontrol namunaga qaraganda). Ikkinchi kontrol probirkasiga oldin 2 ml 0,3M TXK kislotani solib keyin 1 ml ferment eritmasidan qo‘shib termostatda 20 daqiqa ushlab turamiz. So‘ng filtrlab, 1 ml filtratdan olib 5 ml 0,5M natriy karbonat eritmasidan va 1 ml Folin reaktividan qo‘shamiz. Xisobot: Proteolitik aktivlikni formula bo‘yicha aniqlaymiz, ed/mg da. D – FEK da ulangan optik zichligi 4–reaksion aralashmaning xajmi TXK kislotasi qo‘shilgandan keyin. 1,72 – tirozin koeffitsienti, grafik bo‘yicha aniqlanadi. 10 – gidroliz vaqti, min. - ferment preparat miqdori proteoliz ichida olingan (1 ml ferment eritmaga mg da olinadi.) - fruktofuranozidaza (invertaza) kataliz reaksiya orqali uzumdan saxarozani glyukoza va fruktozaga ajratadigan ferment bo‘lib achitqilarda o‘z aktivligini ko‘rsatadi. Uzum pishayotgan vaqtda - fruktoza aktivligi ko‘payadi va uning maksimumi pishgan uzum xosilida bo‘ladi. - fruktoza aktivligi uzumning xar xil navlarida xar xil bo‘ladi. Uzumda invertaza izofermentlari borligi aniqlangan. Agarda uzumning navlarida ferment kam miqdorda bo‘lsa, saxarozaning xam kam miqdorda borligi aniqlanadi. Suslani sulfitatsiyasi - fruktoza aktivligiga salbiy ta’sir etmaydi. Suslani bijg‘ish paytida achitqilardan sharobga o‘zining invertazasini chiqarishadi. Amalietda bu narsa shampan sharoblar ishlab chiqarishda ishlatiladi. SHarobga qo‘shilgan saxarozani inversiyalash uchun, ma’lumki saxarozani inversiyalash shampan sharoblarida - fruktoza orqali amalga oshiriladi . Boshqa xil sharoblarda fermentlarning aktivligi aniqlandi, lekin juda kam miqdorda shampan sharoblarga qaraganda sharoblarni ushlab turishda ferment o‘z aktivini yo‘qotadi. Bentonit, kizelgur, jelatin va SQT (sariq qon tuzi) bilan sharob tindirilinganda ferment xam o‘z faoliyatini to‘xtatadi. Boshqa fermentlarga qaraganda - fruktoza eng saqlanib qoluvchi ferment deb xisoblanadi. Bir xillarida 1-2 yillik turgan sharoblarda uni o‘z aktivligini yo‘qotmaganligi aniqlanishi mumkin. 13 Nazorat savolari: Fermentlarni proteolitik aktivligi deganda nimani tushunasiz? Fermentlar qaerda bo‘ladi va ular nima vazifani bajaradi? Yüklə 363,65 Kb. Dostları ilə paylaş:
|