GEREÇ ve YÖNTEM: CCM2 proteininin ekspresyonu, gelişen ve yetişkin insan neokorteksinde
immünhistokimya ve western blot analizleri kullanılarak belirlenmiştir.
BULGULAR: İmmünhistokimyasal analizlerde CCM2 ekspresyonu, vasküler endotelyum ve nöroglial prekürsör
hücrelerde gelişim sırasında açıkça belirlendi. Yetişkin insan neokorteksinde ise, arteriyel endotelyum, nöronlar
ve bazı glial hücrelerde ekspresyonu dikkat çekiciydi. İmmünhistokimyasal sonuçlarımız western blot analizleri
ile de doğrulandı.
SONUÇ: Bu ekspresyon modeli, CCM2’nin arteriyel endoteli işaretleyen bir belirteç olabileceğini gösterirken,
vasküler kimliğin oluşumunda bir sebep ya da sonuç olabileceği fikrini de düşündürmektedir. Ayrıca, CCM2’nin
insan beyin gelişiminde vaskülogenez ve anjiyogenez sırasında önemli bir rol oynayabileceği düşünülebilir.
Dahası, bu çalışmayla insan neokorteksinin gelişiminde CCM2 proteininin varlığı ilk defa gösterilmiş olacaktır.
Anahtar Kelimeler: CCM2, İnsan neokorteksi, İmmünhistokimya, Western blot
Cerebral cavernous malformation-2 (CCM2) expression during prenatal
development and adult human neocortex
OBJECTIVES: Cerebral cavernous malformation (CCM) is one of the most common types of vascular
malformations of the central nervous system, affecting nearly one in 200 people. CCM lesions are characterized
by grossly dilated vascular channels lined by a single layer of endothelium. Genetic linkage analyses have
mapped three CCM loci to CCM1, CCM2 and CCM3. All three causative genes have now been identified allowing
new insights into CCM pathophysiology. We hypothesized that the CCM2 protein might participate in blood
vessel formation. Therefore, our aim was to investigate the expression and distribution of CCM2 protein in
human prenatal and adult neocortex.
MATERIALS & METHODS: We reported here the expression patterns of CCM2 by using immunohistochemistry
and Western blot analysis.
RESULTS: CCM2 was obviously detected in vascular endothelium and neuroglial precursor cells during
development and also observed in arterial endothelium, neurons, some of the glial cells in adult neocortex.
CONCLUSION: The expression patterns suggest that it could be one of the arterial markers whether this is
cause or consequence of an altered vascular identity. CCM2 might play a role during vasculogenesis and
angiogenesis during human brain development. Furthermore, with this study, CCM2 have been described for
the first time in developing human neocortex.
Keywords: CCM2, Human neocortex, Immunohistochemistry, Western blotting
Poster Bildiriler / Poster Presentations
133
P40
Prenatal dönemde uygulanan non steroidal anti inflamatuar ilaçların dişi rat
servikal spinal kord histomorfolojisi üzerine etkileri:
stereolojik bir çalışma
Süleyman Kaplan
1
, Hakan Kesici
2
, M. Eyüp Altunkaynak
1
, Mehmet Emin Önger
1
, Ö. Faruk Cihan
3
,
Hüseyin Aslan
2
1
Ondokuz Mayıs Üniversitesi, Tıp Fakültesi, Histoloji ve Embriyoloji Anabilim Dalı, Samsun
2
Gaziosmanpaşa Üniversitesi, Tıp Fakültesi, Histoloji ve Embriyoloji Anabilim Dalı, Tokat
3
Gaziantep Üniversitesi, Sağlık Hizmetleri Meslek Yüksek Okulu, Gaziantep
1
Department of Histology and Embryology, Medical Faculty, Ondokuz Mayis University, Samsun, Turkey
2
Department of Histology and Embryology, Medical Faculty, Gaziosmanpasa University, Tokat, Turkey
3
Vocational High School of Health Services, Gaziantep University, Gaziantep, Turkey
AMAÇ: Non steroid anti inflamatuar ilaçlar (NSAID), prenatal dönemde kullanıldıklarında hem anne, hem de
fetus için zararlı etkiler oluşturabilmektedirler. Bu ilaçlardan biri olan diklofenak sodyum (DS), gebelikte
kullanıldığında merkezi sinir sistemi ve ilişkili yapıları etkileyebilmektedir. Ancak spinal kord üzerine etkilerini
araştıran çalışmaya rastlanmamıştır. Bu çalışmada, prenatal dönemde uygulanan DS’nin servikal spinal kord
gelişimi üzerine etkisi stereolojik metodlar kullanılarak araştırılmıştır.
GEREÇ ve YÖNTEM: Hamile ratlar, ilaç uygulanan grup ve kontrol grubu olmak üzere iki gruba ayrıldı. İlaç
uygulanan gruptaki ratlara hamileliğin 5. gününden başlanarak 20. gününe kadar günlük 1 mg/kg dozunda DS
(Voltaren, 75 mg/3 ml ampül, Novartis) intra peritoneal (i.p.) enjekte edildi. Kontrol grubu ratlara ise aynı
sürede günlük 1 ml/kg serum fizyolojik i.p. enjekte edildi. Doğumdan sonra dişi yavrular alınarak 4 haftalık ve
20 haftalık olmak üzere iki alt gruba ayrıldılar.
BULGULAR: Prenatal dönemde uygulanan DS, toplam nöron sayısını hem 4 haftalık (p
<
0,05) hem de 20
haftalık (p
<
0,01) alt gruplarda kontrol grubuna kıyasla önemli ölçüde azaltmıştır. Ayrıca, özellikle 20 haftalık alt
grupta (p
<
0,01) olmak üzere, servikal spinal kord (C1-C4) toplam hacim değerlerinde de önemli azalmalar
tespit edilmiştir.
SONUÇ: DS, ratlarda C1-C4 spinal kord segmentlerinin gelişimini ileri derecede etkilemektedir. Ancak
teratojenik etki mekanizmasının tam olarak anlaşılabilmesi için daha ileri çalışmalara ihtiyaç vardır.
Anahtar Kelimeler: Diklofenak sodyum, Servikal spinal kord, Dişi, Sıçan, Stereoloji
Prenatal exposure to a non steroidal anti inflammatory drug causes
histomorphological changes within the female rat cervical spinal cord:
A stereological study
OBJECTIVES: Nonsteroidal anti-inflammatory drugs (NSAIDs) can have adverse effects on both maternal and
fetus following administration during the prenatal period. Diclofenac sodium (DS), a NSAID, was given during
the pregnancy, may also affect development of the central nervous system (CNS) or related structures.
However, there is no investigation concerning its role in the female cervical spinal cord. In this study, the
effects of DS on the developing cervical spinal cord following administration of the prenatal period were
investigated in the female pups using stereological methods.
MATERIALS & METHODS: Pregnant rats were divided into two groups, namely drug-treated and control
(saline-injected) groups. To obtain the offspring of the drug-treated group, a dose of 1 mg/kg daily for 15 days
of period diclofenac sodium (Voltaren, 75 mg/3 ml ampoule, Novartis) was injected into the pregnant rats
beginning from the 5
th
day after mating to the 20
th
day of the pregnancy. To obtain the control group of
offspring, serum physiological at a 1 ml/kg daily dose was injected into the pregnant control rats during the
same period. The female offspring were obtained after delivery and each group was divided into two subgroups
as 4-week-old and 20-week-old.
RESULTS: Prenatal DS administration leads to a significant decrease in the total neuron number in the 4-week-
old (p
<
0.05) and 20-week-old subgroup (p
<
0.01). The total volume of the cervical spinal cord segments (C1–
C4) was also estimated. There was a significant difference between the volumes of two groups, especially in the
20-week-old subgroup (p
<
0.01).
CONCLUSION: It is found that DS significantly decreased not only cell number of gray matter but also the
volume of C1–C4 spinal cord regions of the female rat, and the exact teratogenic mechanism of DS is not clear
yet; therefore it should be investigated.
Keywords: Diclofenac sodium, Cervical spinal cord, Female, Rat, Stereology
Poster Bildiriler / Poster Presentations
134
P41
Prenatal dönemde uygulanan diklofenak sodyumun 20 haftalık sıçanların nervus
medianusuna etkisinin araştırılması
Ebru Ayrancı
1
, B. Zuhal Altunkaynak
1
, Abit Aktaş
2
, Murat Ç. Rağbetli
3
, Süleyman Kaplan
1
1
Ondokuz Mayıs Üniversitesi, Tıp Fakültesi, Histoloji ve Embriyoloji Anabilim Dalı, Samsun
2
İstanbul Üniversitesi, Veteriner Fakültesi, Histoloji ve Embriyoloji Anabilim Dalı, İstanbul
3
Yüzüncü Yıl Üniversitesi, Tıp Fakültesi, Histoloji ve Embriyoloji Anabilim Dalı, Van
1
Ondokuz Mayis University, Faculty of Medicine, Department of Histology and Embryology, Samsun, Turkey
2
Istanbul University, Faculty of Veterinary Medicine, Departments of Histology and Embryology, Istanbul, Turkey
3
Yüzüncü Yıl University, Faculty of Medicine, Departments of Histology and Embryology, Van, Turkey
AMAÇ: Bu çalışmada nonsteroidal anti inflamatuvar bir ilaç olan diklofenak sodyum (DS)’nin prenatal dönemde
uygulanmasının median sinir gelişimi üzerinde yol açabileceği muhtemel etkilerin postnatal dönemde
incelenmesi amaçlandı.
GEREÇ ve YÖNTEM: Çalışmada kullanılan Wistar albino cinsi, erişkin dişi sıçanlar ile erkek sıçanlar çiftleşmeye
bırakıldı (150–200g; n= 6). Gebe kaldığı kabul edilen sıçanlar; hiçbir işlemin yapılmadığı kontrol grubu, serum
fizyolojik (SF) uygulanan grup ve diklofenak sodyum (DS) uygulanan grup olmak üzere üç gruba ayrıldı. SF
grubuna günlük 1 ml/kg SF; DS grubuna ise günlük 1mg/kg DS, gebeliklerinin 5. gününden 19. gününe kadar
enjekte edildi. Doğumdan sonraki 20. haftada sakrifiye edilen erkek ve dişi sıçanların sağ nervus medianusları
dissekte edildi. Elektron mikroskobik incelemesi yapılan median sinir örneklerinden elde edilen 1µm
kalınlığındaki kesitler toluidin mavisi ile boyandı. Kesitlerde bilgisayar destekli stereolojik analiz sistemi (CAST-
GRID) kullanılarak akson sayısı, akson alanı ve miyelin kılıfı kalınlığı analizleri yapıldı.
BULGULAR: Analizlerden elde edilen bulguların istatistiksel olarak değerlendirilmesi sonucunda erkek sıçan
grupları arasında akson sayısı bakımından anlamlı bir fark olmadığı (p>0,05); yine akson alanı ve miyelin kılıf
kalınlığı ölçümlerinde de gruplar arasında anlamlı bir fark olmadığı (p>0.05) gözlendi. Yirmi haftalık dişi
sıçanlardan oluşan kontrol, SF ve DS gruplarına ait örnekler üzerinde yapılan benzer ölçümler sonucunda da;
gruplar arasında akson sayısı, akson alanı ve miyelin kılıfı kalınlığı bakımından anlamlı bir fark olmadığı
(p>0.05) görüldü. SF ve DS uygulanan gruplarda hiç bir parametre açısından cinsiyete bağlı bir fark
bulunmadığı (p>0.05), buna karşın, kontrol grubunda erkek ve dişi sıçanlardan elde edilen sinir örnekleri
üzerinde yapılan akson sayısı, akson kesit alanı ve miyelin kılıf kalınlığı değerlendirmesinden elde edilen
sonuçlara göre; sözü edilen grupların tüm parametreler açısından birbirlerinden anlamlı ölçüde farklı olduğu
(p<0.05) gözlendi. DS grubundan elde edilen median sinir örneklerinde herhangi bir makroskobik anomali
gözlenmedi. Fakat miyelin kılıflarda yer yer büzüşme ve dejenerasyonun olduğu mikroskobik incelemelerde
tespit edildi.
SONUÇ: Dişilerde ve erkeklerde, kontrol ve deney grupları arasında, yirminci haftada hiç bir parametre
bakımından anlamlı fark gözlenmemiştir. Gruplar arasında bir farkın olmaması; dişilerde ve erkeklerde periferik
sinir gelişiminin bu haftada iyi korunduğunu düşündürmektedir.
Anahtar Kelimeler: Diklofenak sodyum, Median sinir, Stereoloji, Sıçan
Ondokuz Mayıs Üniversitesi Bilimsel Araştırma Projeleri tarafından desteklenmiştir (PYO.TIP.1904.09.046).
Investigation of the median nerve of 20 week-old rats exposed to diclofenac sodium at
the prenatal period
OBJECTIVES: The aim of this study was to investigate the possible effects of diclofenac sodium (DS) on
median nerve which were exposed during prenatal life at 20-week-old rats.
MATERIALS & METHODS: For this purpose, adult female rats (Wistar albino) were left with adult male rats for
mating. They were divided equally into three groups (n=6; 150-200g) such as control, physiological saline (PS)
and diclofenac sodium (DS) groups. The pregnant control group rats were not exposed to any substance. The
pregnant PS and DS groups were exposed to saline (1ml/kg) and DS (1ml/kg) from 5
th
day to 19
th
day of the
gestation period, respectively. After postpartum, all male and female rat pups 20-week-aged were sacrificied,
and their right median nerves were dissected. After electron microscopic processes they were embedded in
resin with 1µm thick sections. After toluidine blue staining, numbers of axons, cross section area of axons and
myelin thickness were estimated using the stereology work station (CAST-GRID).
RESULTS: According to our results; there is no significant difference between groups of males with regard to
number of axons (p>0.05). Also cross section area of the axon and the myelin sheath thickness measurements
revealed no differences in males (p>0.05). When same analysis was carried out on the nerve of female rats,
there was no significant difference among groups in respect of parameters (p>0.05). Sex-related difference in
terms of all parameters were not observed between the PS and the DS groups (p>0.05). On the other hand,
the male and female rats that belong to the control group were significantly different from each other in terms
of axon number, axon cross sectional area and myelin sheath thickness (p<0.05). There was no drug-
dependent macroscopic abnormality in median nerve samples observed in this study. However, myelin sheath
degeneration and shrinkage were detected microscopically.
CONCLUSION: The control and experimental groups i.e. PS and DS of females and males were not different
from each other with regard to any parameter at the twentieth week.
Keywords: Diclofenac sodium, Median nerve, Stereology, Rat
Supported by Research Foundation of Ondokuz Mayıs University (PYO.TIP.1904.09.046).
Poster Bildiriler / Poster Presentations
135
P42
Civa buharına maruz kalma beyincikteki Purkinje hücrelerinin azalmasına neden
olabilir
M. Eyüp Altunkaynak
1
, Nilgün Akgül
2
, B. Zuhal Altunkaynak
1
, H. Murat Akgül
3
, Deniz Ünal
4
1
Ondokuz Mayıs Üniversitesi, Tıp Fakültesi Histoloji ve Embriyoloji Anabilim Dalı, Samsun
2
Atatürk Üniversitesi, Diş Hekimliği Fakültesi, Diş Hastalıkları ve Tedavisi Anabilim Dalı, Erzurum
3
Atatürk Üniversitesi, Diş Hekimliği Fakültesi, Oral Diyagnoz ve Radyoloji Anabilim Dalı, Erzurum
4
Atatürk Üniversitesi, Tıp Fakültesi, Histoloji ve Embriyoloji Anabilim Dalı, Erzurum
1
Ondokuz Mayıs University, Faculty of Medicine, Department of Histology and Embryology, Samsun, Turkey
2
Atatürk University, Faculty of Dentistry, Department of Restorative Dentistry, Erzurum, Turkey.
3
Atatürk University, Faculty of Dentistry, Department of Oral Diagnosis and Radiology, Erzurum, Turkey
4
Atatürk University, Faculty of Medicine, Department of Histology and Embryology, Erzurum, Turkey
AMAÇ: Günümüzde ağır metallerin endüstriyel kaynaklı olarak çevreye salınımı ya da mesleki olarak alınması
önemli sağlık problemlerine neden olmaktadır. Örneğin metalik civa buharına maruz kalan deney havanlarında
ve insanlarda tremor ve periferik polinöropati ile sonuçlanan motor ve duyusal bozukluklar görülmektedir.
Benzer birçok klinik gözleme karşın civa buharına maruz kalmanın beyinde yol açtığı histopatolojik ve morfolojik
değişikliklere ilişkin çalışmalar oldukça az sayıdadır. Bu çalışmada metalik civa buharına maruz kalan dişi
sıçanların beyincik yapılarının histolojik ve stereolojik açıdan incelenmesi amaçlanmıştır.
GEREÇ ve YÖNTEM: Bu çalışmada Atatürk Üniversitesi Deneysel Uygulama ve Araştırma Merkezinden Etik
Kurul Onayı ile elde edilen 12 adet Wistar albino cinsi erişkin dişi sıçan (200 gr ağırlığında) özel olarak
tasarlanmış fanus içerisine yerleştirildi. Bu işlemi takiben denekler 45 gün boyunca 1 mg/m
3
/gün civa buharına
maruz bırakıldı. Hiçbir uygulama yapılmayan denekler ise kontrol amaçlı kullanıldı. Deney sonunda tüm
deneklerden elde edilen beyincik örnekleri rutin prosedüre göre takip edilerek ışık mikroskobik düzeyde
stereolojik ve histolojik açıdan değerlendirildi.
BULGULAR: Çalışmada elde edilen bulgulara göre toplam purkinje hücresi sayısı kontrol ve deney gruplarında
sırası ile 440.000 ve 390.000 olarak bulundu (p<0.01). Ayrıca Purkinje hücrelerinin ortalama hacmi de deney
grubunda kontrole kıyasla azalmıştı (p<0.05). Civa buharına maruz kalan deneklerin beyincik tabakalarının
hacimleri değerlendirildiğinde granüler hücre tabakasının hacminin anlamlı ölçüde azaldığı (p<0.05), diğer
tabaka hacimlerinde ise anlamlı bir değişiklik olmadığı saptandı (p>0.05).
SONUÇ: Akut ve kronik etkileri kesin olarak bilinmeyen ağır bir metal olan civanın olası toksik etkileri göz
önünde tutarak daha kontrollü ve bilinçli kullanılması, Maruz kalan bireylerde motor ve bilinçsel sorunlarının
yaşanmaması açısından büyük önem taşımaktadır. Ayrıca bu çalışmadan elde edilen sonuçların gösterdiği üzere
endüstri ve tıp alanında yaygın olarak kullanılan civa denekler ve muhtemelen de insanların merkezi sinir
sistemleri üzerinde olumsuz etkiler oluşturabilmektedir.
Anahtar Kelimeler: Civa buharı, Beyincik, Stereoloji, Histopatoloji, Sıçan
Exposure of mercury vapor may lead to decrease in cerebellar Purkinje cells
OBJECTIVES: One environmental problem of concern today is occupational or environmental exposure to
metallic mercury vapor which has been reported to result in tremor, peripheral polyneuropathy and both motor
and sensory disturbances in experimental animals or humans. Similarly, although many clinical observations in
the brain caused by exposure to mercury vapor, histopathological studies on morphological changes is a few
number. In this study, it was aimed to determine stereological and histological structure of cerebella among
female rats exposed to metallic mercury vapor.
MATERIALS & METHODS: In this study we used 12 adult female Wistar albino rats (200 g in weight) obtained
from Experimental Research and Application Center of Ataturk University with ethic approval, and they were
placed into a specially designed glass cage. Along this experiment for 45 days, subjects were exposed to 1
mg/m3/day mercury vapor. No application was used for the control subjects. At the end of the experiment,
cerebellum samples were obtained from all subjects and processed for routine light microscopic level and
stereological and histological aspects were assessed.
RESULTS: The total number of Purkinje cells was defined as 440,000 and 390,000 in the control and
experimental groups, respectively (p<0.01). In addition, the mean volume of Purkinje cells in the experimental
group was significantly decreased compared to controls (p<0.05). In subjects exposed to mercury vapor,
volume of cerebellar granular cell layer significantly decreased (p<0.05), there was no significant change in
volume of the other layers (p> 0.05).
CONCLUSION: Acute and chronic effects of mercury are not certainly known. So, more controlled and
conscious using of the mercury with taking into account of their possible toxic effects has great importance in
terms of exposed individuals, so as to avoid motor and cognitive problems. In addition, our results show that
mercury widely used in the field of industry and medicine may cause neuro-degeneration in rats and probably
humans.
Keywords: Mercury vapor, Cerebellum, Stereology, Histopathology, Rat
Poster Bildiriler / Poster Presentations
136
P43
Metalik civa buharına maruz kalan sıçanlarda hipokampus hasarı: Stereolojik ve
histolojik bir çalışma
Nilgün Akgül
1
, B. Zuhal Altunkaynak
2
, M. Eyüp Altunkaynak
2
, H. Murat Akgül
3
, Bünyamin Ünal
4
1
Atatürk Üniversitesi, Diş Hekimliği Fakültesi, Diş Hastalıkları ve Tedavisi Anabilim Dalı, Erzurum
2
Ondokuz Mayıs Üniversitesi, Tıp Fakültesi, Histoloji ve Embriyoloji Anabilim Dalı, Samsun
3
Atatürk Üniversitesi, Diş Hekimliği Fakültesi, Oral Diyagnoz ve Radyoloji Anabilim Dalı, Erzurum
4
Atatürk Üniversitesi, Tıp Fakültesi, Histoloji ve Embriyoloji Anabilim Dalı, Erzurum
1
Atatürk University, Faculty of Dentistry, Department of Restorative Dentistry, Erzurum, Turkey
2
Ondokuz Mayıs University, Faculty of Medicine, Department of Histology and Embryology, Samsun, Turkey
3
Atatürk University, Faculty of Dentistry, Department of Oral Diagnosis and Radiology, Erzurum, Turkey
4
Ataturk University, Faculty of Medicine, Department of Histology and Embryology, Erzurum, Turkey
Dostları ilə paylaş: |