Сборник статей d Ставрополь, 2012 удк (082): 159. 9: 616-085:=>616-089: 616-053. 2: 616. 31 Ббк 72. 471. 3я431(2Рос-4Ста) и 66 Научно-практическая конференция с международным участием «Инновации молодых учёных»


Показатели периферической гемодинамики



Yüklə 6,03 Mb.
səhifə4/37
tarix13.03.2017
ölçüsü6,03 Mb.
#11129
növüСборник статей
1   2   3   4   5   6   7   8   9   ...   37

Показатели периферической гемодинамики

в группах исследуемых



Правая рука

Левая рука

Группы исследу-емых

СРПВ

(м/с)

ПСС

(мл/мм рт. ст.)

ОПСС

(дин•см ¯5 •с)

СРПВ

(м/с)

ПСС

(мл/мм рт. ст.)

ОПСС

(дин•см ¯5 •с)

1 (n=137)

5,4±0,11

1,63±0,14

1063±26

5,3±0,15

1,52±0,05

1074±21

2 (n=103)

7,3±0,12*

1,15±0,05

1165±14*

5,5±0,14

2,18±0,13*

1085±20

3 (n=19)

8,79±0,15*

0,9±0,2

1150±23*

5,5±0,13

2,24±0,12*

1060±18

Примечания: 1 - группа сравнения; 2 - группа с транзиторной асимметрией АД; 3 - группа с постоянной асимметрией АД; * - p<0,05 - достоверные различия по сравнению с группой сравнения
Таким образом, ЛАД справа и слева сопровождается изменениями СРПВ, ПСС и ОПСС. Выявленное региональное изменение СРПВ, зависящее от состояния напряжения сосудистой стенки у молодых обследуемых [7], параметров растяжимости, жесткости артерий и ПСС, также характеризующих тонус артерий [4,6], указывает на возможные механизмы ЛАД. Увеличение СРПВ на стороне доминирования АД, сопровождающееся повышением ОПСС (p<0,05), может указывать на проявление усиления симпатических влияний и сопровождаться усилением напряжения сосудистой стенки и увеличением жесткости артерий.

Заключение. Выявленное региональное изменение СРПВ на стороне доминирования АД, зависящее от состояния напряжения сосудистой стенки у молодых обследуемых, параметров растяжимости, жесткости артерий и ПСС, также характеризующих тонус артерий, указывает на возможные механизмы ЛАД.
Литература

  1. Дмитриева Е. В. Изменения регионарного и общего вегетативного тонуса в условиях сосудистой асимметрии/ Е. В. Дмитриева // Материалы XII итог. (межвуз.) науч. конф. студентов и молодых ученых. – Ставрополь, 2004. - С. 77 - 78.

  2. Елисеева Е. В. Характеристика вегетативного статуса при сосудистой асимметрии // Механизмы функционирования висцеральных систем. Всерос. конф. с международ. участием. – СПб, 2001. – С. 115-116.

  3. Кобалова Ж. Д. Высокое систолическое давление: акцент на эластические свойства артерий / Ж. Д. Кобалова, Ю. В. Котовская, М. А. Маркова // Кардиоваск. тер. и профил. - 2006. - №6. - С. 10-16.

  4. Комарова Е. В. Определение асимметрии артериального давления у здоровых людей в зависимости от вегетативной активности и показателя ведущей руки / Е. В. Комарова, Е. Ю. Могильная, Ю. С. Кривошеев // Материалы XI итог. науч. конф. молодых учёных и студентов. - Ставрополь, 2003. - С.549-550.

  5. Кочкина М. С. Измерение жесткости артерий и ее клиническое значение / М. С. Кочкина, Д. А. Затейщиков, Б. А. Сидоренко // Кардиология. – 2005. - №1. - С. 63-71.

  6. Лопатин Ю. М. Эластичность артерий и скорость пульсовой волны у больных с хронической сердечной недостаточностью различной этиологии / Ю. М. Лопатин, О. В. Илюхин, М. В. Илюхина // Сердечная недостаточность. - 2004. - №4. – С. 130-131.

  7. Семина Л. И. Об асимметрии артериального давления на плечевой артерии у больных с цереброваскулярной патологией / Л. И. Семина, A. M. Юнес // Журн. невропатологии и психиатрии. - 1992. - №1. - С. 27-31.

  8. Ткаченко Е. В. Состояние вегетативной нервной регуляции у беременных с асимметрией артериального давления / Е. В. Ткаченко // Физиологические проблемы адаптации: материалы межрегион. конф. - Ставрополь, 2003. - С. 166-166.

  9. Benedicic M. Left-right asymmetry of the facial microvascular control / M. Benedicic, V. V. Dolenc, A. Stefanovska // Clinical Autonomic Research. - 2006. - Vol. 16, №1. - Р. 58 - 60.

  10. Greenwald S. E. Pulse pressure and arterial elasticity / S. E. Greenwald // Quart. J. Med. - 2002. - Vol. 95. №2. – Р. 107-112.

  11. Jilek Jiri. Oscillometric blood pressure measurement: The methodology, some observations, and suggestions/ Jiri Jilek , Teiichiro Fukushima // Biomed. Instrum. and Technol. - 2005. - Vol. 39. № 3. - Р. 237 – 241.

  12. Lantelme Pierre. Heart rate: An important confounder of pulse wave velocity assessment / Pierre Lantelme, Christine Mestre, Michel Lievre // Hypertension. - 2002. - Vol. 39. №6. – Р. 1083 - 1087.


Kulakova T. B.

THE TONE OF THE VESSELS IN THE BASIN OF HUMERAL ARTERIES TO THE RIGHT AND TO THE LEFT AT THE SYMMETRY AND ASYMMETRY OF THE BLOOD PRESSURE
To study the characteristics of peripheral hemodynamics in the young persons with the symmetry and asymmetry of the blood pressure were inspected 259 peoples. Held a synchronous measurement of the blood pressure in the right and left brachial artery and peripheral hemodynamics study by volumetric computer compression oscillometry. Revealed regional changes in the peripheral hemodynamics indexes, depending on the state of stress in the vascular wall of the young subjects, settings extensibility and arterial stiffness, indicating that the possible mechanisms of vascular asymmetry.

Keywords: asymmetry of arterial pressure, spread velocity of the pulse wave, pliability of vascular wall, general peripheral resistance of vessels.
УДК 615.272.074:543.544

Т.В. Моталова, М.Н. Мигилева

Разработка методики Определения

ловастатина и его метаболита в плазме крови методом Высокоэффективной жидкостной

хроматографии (ВЭЖХ)

ГБОУ ВПО «Рязанский государственный медицинский

университет имени акад. И.П.Павлова» Министерства

здравоохранения РФ,

Рязань, Россия
Введение. Основным биохимическим маркером высокого риска развития коронарного атеросклероза является повышенный уровень холестерина липопротеидов низкой плотности в крови. Именно этот показатель коррелирует с заболеваемостью ишемической болезни сердца (ИБС). В настоящее время в качестве препаратов выбора для первичной и вторичной профилактики сердечно-сосудистых заболеваний рекомендуется использовать статины. Ловастатин - первый препарат из группы статинов, характеризующийся выраженным гипохолестеринемическим действием.

В развитых странах мира препараты группы статинов с успехом применяют миллионы больных. В России назначения этих препаратов в практической кардиологии явно недостаточно, несмотря на многочисленные доказательства преимущества статинов. Основным фактором, ограничивающим применение статинов для нашей страны, является высокая стоимость препаратов этой группы зарубежного производства.

Интенсивная гиполипидемическая терапия с помощью статинов может быть расширена за счет применения воспроизведенных препаратов - лекарственных средств, выпускаемых различными фармацевтическими компаниями после прекращения срока действия патента на оригинальный препарат.

Регистрация нового генерического препарата (дженерика) происходит после успешного прохождения им пробы на биоэквивалентность с оригинальным препаратом. Для установления биоэквивалентности генерических и оригинальных препаратов выполняется специальное фармакокинетическое исследование, позволяющее сравнить относительную биодоступность лекарственного вещества при введении одинаковых доз при одинаковых условиях. Стандартная процедура представляет собой измерение уровней концентрации сравниваемых препаратов в крови после получения однократной дозы вещества.

В настоящее время для количественного анализа лекарственных средств самым универсальным и распространённым методом является высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ) – метод разделения компонентов смеси, основанный на различии в равновесном разделении их между двумя несмешивающимися фазами, одна из которых неподвижна, а другая подвижна. За счет различия в сродстве компонентов смеси к неподвижной и подвижной фазам достигается основная цель хроматографии – разделение за определенный промежуток времени смеси на отдельные полосы (пики) компонентов по мере их продвижения по колонке с подвижной фазой.

Так как ловастатин - пролекарство, и вследствие пресистемной элиминации подвергается метаболическому превращению, необходимо определять концентрацию именно биологически активного метаболита. Изучение динамики концентрации лекарственных средств одновременно с их метаболитами позволяет определить, связано ли значительное отклонение концентрации препарата в крови с изменениями на стадии всасывания лекарственного препарата или на стадии его метаболизма.



Цель - разработка методики совместного количественного определения ловастатина и его метаболита в плазме крови.

Материалы и методы. Исследование проводили на высокоэффективном жидкостном хроматографе «Bekman coulter» с УФ - спектрофотометрическим детектором при длине волны 246 нм.

Использовали обращённофазную хроматографическую колонку: Hypersil ODS С 18 125х4 mm 5 мкм (Phenomenex) с термостатированием (термостат column oven LCO 101); лабораторное оборудование: центрифугу, вакуумный испаритель, магнитную мешалку, рH-метр-иономер; реактивы «Реахим». Элюирование проводили в изократическом режиме мобильной фазой состава: метанол – фосфатный буфер в соотношении 78:22, рН системы 7,24. Скорость потока составила 1,0 мл/мин. ловастатин и его метаболит из плазмы крови экстрагировали смесью хлороформа и изопропанола (9:1).

Для оценки точности и воспроизводимости методики количественного определения ловастатина и его активного метаболита в плазме крови были рассчитаны метрологические характеристики по результатам 10 параллельных измерений двух концентраций определяемых веществ.

Результаты и обсуждение. Существует много методик определения статинов методом обратнофазной высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) но, учитывая сложность метода (использование внутреннего стандарта, градиента концентрации), они не всегда воспроизводимы на местах.

Описанные отечественные методики с использованием осаждения белков крови и последующим анализом надосадочной жидкости с помощью ВЭЖХ для определения ловастатина не применяются из-за низкой чувствительности и большого количества эндогенных веществ, мешающих определению. Кроме того, при использовании данного способа существенно возрастает риск загрязнения хроматографической колонки недоосажденными белками крови. В иностранной литературе описано много методик определения метаболита ловастатина методом ВЭЖХ, базирующимся на применении твердофазовой экстракции с использованием дорогих патронов Sep-Pak C18 (фирмы «Waters»).

При выборе условий разделения были опробованы различные колонки и составы подвижных фаз. Оптимальными были признаны следующие условия: хроматографическое разделение проводили при температуре 50±1°С в изократическом режиме на микроколонке Hypersil ODS C18 125*4 mm и зернением сорбента 5 мкм, детектирование проводили при длине волны 246 нм. В качестве подвижной фазы использовали смесь метанола и фосфатного буфера, взятых в соотношении 78,0:22,0 по объему, рН системы 7,24. Перед применением мобильную фазу дегазировали под вакуумом. Скорость элюирования составляла 1,0 мл/мин. Время удерживания ловастатина в этих условиях составило 14,7 ±0,3 мин, метаболита - 6,5 ±0,2 мин (рис.).

Рис. Типичная ВЭЖХ - хроматограмма одновременного определения ловастатина и его метаболита в концентрациях 10 мкг/мл


Предел детектирования ловастатина и его метаболита составил 10 нг/мл, предел количественного определения 20 нг/мл. Пики ловастатина и его метаболита отделены от пиков эндогенных соединений, что позволило достоверно определить исследуемые вещества.

Из плазмы крови препарат извлекали экстракцией смесью хлороформа и изопропанола (9:1) после подкисления пробы раствором соляной кислоты.

К образцу плазмы крови объемом 350 мкл добавляли 350 мкл 1 Н раствора соляной кислоты и 7,0 мл экстракционной смеси. Проба подвергалась энергичному встряхиванию в течение 20 минут с последующим центрифугированием при 1500 об/мин в течение 20 минут. Затем нижний органический слой отбирали и упаривали досуха. Сухой остаток растворяли в 100 мкл подвижной фазы, для полноты растворения смесь подвергали обработке на вибромиксере типа «Vоrtex» и 50 мкл полученного раствора вводили в хроматографическую систему.

Коэффициент экстракции ловастатина при такой обработке составлял 96±2,9%, а метаболита - 65±4,3%.

Количественное определение ловастатина и метаболита осуществляли по методу абсолютной калибровки, которую проводили по результатам хроматографического анализа ловастатина и метаболита в контрольных смесях.

Для этого были приготовлены калибровочные стандартные растворы ловастатина и метаболита в интактной сыворотке крови с концентрацией препарата 5; 10; 25; 50; 75 и 100 нг/мл. Приготовленные образцы стандартных растворов обрабатывали и анализировали по методике, описанной выше.

По результатам анализа, на основе измерений площадей хроматографических пиков, был построен калибровочный график. Измеренные значения концентраций были линейны во всем исследованном диапазоне (0-100 нг/мл), и график представлял прямую линию (коэффициент корреляции г2=0,9974 для ловастатина, и г2=0,9983 для метаболита). Точность разработанной методики составила: для ловастатина – 3,8 %, а для метаболита 4,5 %. Воспроизводимость метода находится в пределах 88-96% от номинальной концентрации для ловастатина и 94-107% - для его метаболита.

Заключение. Разработанная методика определения ловастатина и его метаболита методом ВЭЖХ отличается высокой точностью и воспроизводимостью.
T.V. Motalova, M.N. Migileva

development of methods FOR DETERMINING lovastatin and its metaboliteS IN PLASMA BY HIGH PERFORMANCE Liquid chromatography (HPLC)

In order to establish bioequivalence of generic and original medicines lovastatin developed a technique of high performance liquid chromatography and characterized by high accuracy and reproducible.



Keywords: lovastatin, high performance liquid chromatography (HPLC),

УДК: 616.379-008.64:577.17.049

А.Б.Муравьева

НЕДОСТАТОК МАКРО- И МИКРОЭЛЕМЕНТОВ КАК ОДИН ИЗ

ПРИЗНАКОВ ПРЕДРАСПОЛОЖЕННОСТИ К

САХАРНОМУ ДИАБЕТУ

ГБОУ ВПО «Ставропольская государственная медицинская академия»

Министерства здравоохранения РФ,

Ставрополь, Россия


Жизненно необходимые (эссенциальные) микроэлементы оказывают действие на организм в основном опосредованно, управляя деятельностью гормонов, ферментов, белков, жиров, углеводов, витаминов и прочих биологически активных веществ. Это управление осуществляется за счет поддержания определенных концентраций необходимых микроэлементов в организме и тканях. Любое изменение концентрации того или иного эссенциального микроэлемента может привести к развитию целого ряда заболеваний [2].

Было проведено много исследований, которые подтвердили, что на течение и лечение сахарного диабета значительное влияние оказывают такие химические элементы как: натрий, калий, цинк, хром, медь и железо.



Цель исследования: на модели аллоксан-индуцированного сахарного диабета изучить сдвиги в содержании макро- и микроэлементов.

Материалы и методы исследования. Опыты были проведены на лабораторных мышах. Экспериментальных животных (n=30) делили на три группы (по 10 в каждой). Первая группа – интактные животные, вторая – мыши, которым вводили физиологический раствор, и третья группа – животные, которым путем однократного подкожного введения аллоксана тетрагидрата в дозе 150мг/кг был вызван аллоксановый диабет.

На 15 сутки наблюдения у животных, декапитировав, забирали кровь для определения содержания макро- (Na, K, Ca) и микро- (Zn, Fe, Cu) –элементов атомно-адсорбционным методом.

Статистическую обработку полученных результатов проводили параметрическим методом с использованием t-критерия Стьюдента.



Результаты и их обсуждения. Изучение элементного статуса в крови животных показало, что на 15-е сутки после введения аллоксана наблюдалось понижение уровня натрия до 170,87±7,031 ммоль/л (в контроле 192,43±1,274 ммоль/л); калия 1,947±0,11 ммоль/л (в контроле 1,95±0,166 ммоль/л) и цинка до 16,275± 0,880 мкмоль/л (в контроле 24,58± 1,61 мкмоль/л). При этом отмечалось повышение концентрации железа до 53,580 ±1,903 мкмоль/л (в контроле 41,39 ±0,432 мкмоль/л) и кальция до 5,24 ±0,06 моль/л (в контроле 1,71 ±0,064 моль/л) в крови мышей с аллоксановым диабетом (таблица).

Это объясняется тем, что при сахарном диабете возникает дефицит цинка в организме, так как он является необходимым элементом для синтеза и секреции инсулина, а также пищеварительных ферментов поджелудочной железы. При дефиците цинка задерживается рост, нарушается обмен веществ, возникает инсулиновая недостаточность [1].

Известна также физиологическая роль цинка как антиоксиданта, предохраняющего клетку от свободных радикалов, образующихся в результате перекисного окисления липидов. Возникновение таких радикалов приводит ко многим заболеваниям, сопровождающим сахарный диабет. Цинк поддерживает кислотно-щелочной уровень в крови и других жидкостях, он необходим для правильной работы предстательной железы [5].



Таблица

Содержание микро- и макроэлементов в сыворотке крови у мышей с аллоксановым диабетом





Натрий

(ммоль/л)

Калий

(ммоль/л)

Кальций

(моль/л)

Цинк

(мкмоль/л)

Железо

(мкмоль/л)

Медь

(мкмоль/л)


Норма

М= 188,497

±1.274


М= 3,049

±0.166


М= 1,851

± 0,064


М= 25,498

± 1,61


М= 42,739

± 0,432


М= 9,070

± 0,152


Физ.раствор

(контроль)

М= 192,43

± 1,274


М= 1,95

±0.166


М= 1,71

± 0,064


М= 24,58

± 1,61


М= 41,39

± 0,432


М= 9,07

± 0,152


Аллоксан

(1 мл)

М= 170,87

±7,031


р*

М= 1,947

±0,110


р*

М= 5,24

± 0,060


р*

М= 16,275

± 0,880


р*

М= 53,580

± 1,903


р*

М= 8,335

± 0,309


р*
Примечание: p*- достоверность различий при сравнении показателей опытных групп с контролем < 0,01
Значительное изменение содержания натрия может быть связано с нарушением водно-солевого обмена, дисфункцией коры надпочечников и гипофиза. Это явление встречается при сахарном диабете, гипонатриемия возможна из-за уменьшения реабсорбции натрия почечными канальцами (снижение активности ферментов в канальцах) [3].

Незначительное понижение уровня калия в организме обычно приводит к изменению функции почек и истощению функции надпочечников, риску нарушения обменных процессов и проводимости в миокарде, нарушению регуляции артериального давления, иногда — сахарному диабету. Дефицит калия снижает работоспособность, замедляет заживление ран, ведет к неправильной нервно-мышечной проводимости [1].

Проведенный анализ крови животных с аллоксановым диабетом указал также на количественный сдвиг между эссенциальными элементами. Так, содержание меди 8,335±0,309 мкмоль/л оказалось ниже контрольных значений (9,070±0,152 мкмоль/л) из-за развития окислительного стресса. Медь является кофактором фермента супероксиддисмутазы, участвует в антиоксидантной системе защиты организма от окислительного стресса [6].

Из литературных данных известно, что при сахарном диабете может повышаться уровень железа, так как оно может играть роль промотора перекисного окисления липидов [6]; и кальция, что связано с положительным влиянием кальция на свёртывание крови. Кальций способствует уменьшению проницаемости стенок кровеносных сосудов и является необходимым элементом для нормального функционирования мышц. Мало того, он оказывает еще и противовоспалительное действие [4].

Заключение: проведенные исследования показали, что нарушение содержания микро- и макроэлементов в организме может говорить о признаках сахарного диабета. Нарушения биоэлементного обмена неблагоприятно отражаются на течении и исходе сахарного диабета, поэтому целесообразно включать в комплексное исследование больных, склонных к сахарному диабету, одновременное определение калия, натрия, кальция, магния, железа, цинка и меди с последующей их коррекцией.

Литература

  1. Гуревич К.Г. Нарушения обмена микроэлементов и их коррекция // Фарматека. — 2001. — № 3. — С. 45-53.

  2. Скальный. А. В. С 42 Микроэлементы для вашего здоровья /2-е изд., испр. и доп. — М.: Издательский дом «ОНИКС 21 век», 2004. - 320, [2] с.

  3. Хворостинка В.Н., Особенности нарушения микро- и макроэлементного спектра сыворотки крови при жировой дистрофии печени у больных сахарным диабетом 2-го типа/ Хворостинка В.Н., Лахно О.В., Цивенко О.И. // Оригинальные исследования. Харьковский государственный медицинский университет Международный эндокринологический журнал . – 2007- №9 .

  4. Эльбекьян К.С. Особенности нарушения макро- и микроэлементного спектра сыворотки крови при экспериментальном сахарном диабете./Эльбекьян К.С., Ходжаян А.Б., Муравьева А.Б.//Медицинские науки. – 2011-№10.

  5. Ultratrace minerals. Authors: Nielsen, Forrest H. USDA, ARS Source: Modern nutrition in health and disease / editors, Maurice E. Shils ... et al.. Baltimore: Williams & Wilkins, c 1999., p. 283–303. Issue Date: 1999 URI.

  6. Sullivan J.L., Iron and the sex difference in heart disease risk//Lancet.-1981.-Vol.1, № 3. – Р. 1293-1294.


Kataloq: userfiles -> depts
depts -> Рабочая учебная программа дисциплины «эндодонтия» для специальности 060201. 65 «Стоматология» Всего зет 6 Всего часов 216, из них
depts -> Рабочая учебная программа дисциплины «пародонтология» для специальности 060201. 65 «Стоматология» Всего зет 4
depts -> Руководство по практическим умениям педиатра [Текст]: учеб пособие для вузов / под ред. В. О. Быкова изд. 3-е, стереотип. Ростов н/Д: Феникс, 2010. 574 с.: табл., рис
depts -> Кафедра урологии, детской урологии-андрологии с курсом рентгенологии фпдо
depts -> Viruses with a cell of humans and animals. Reproduction of viruses. Methods of diagnostics of virus infections

Yüklə 6,03 Mb.

Dostları ilə paylaş:
1   2   3   4   5   6   7   8   9   ...   37




Verilənlər bazası müəlliflik hüququ ilə müdafiə olunur ©www.azkurs.org 2022
rəhbərliyinə müraciət

    Ana səhifə