Проф. Ф. Г. Аьамалыйев р я й ч и л я р


Ентомоложи обйектлярин йарылмасы



Yüklə 14,29 Mb.
Pdf görüntüsü
səhifə2/18
tarix03.02.2017
ölçüsü14,29 Mb.
1   2   3   4   5   6   7   8   9   ...   18

Ентомоложи обйектлярин йарылмасы 
 
Щяшяратын  анатомик  гурулуш  хцсусиййятляри  бядянин 
йарылмасы йолу иля тядгиг олунур. Йалныз бядян бошлуьу йахшы 
инкишаф етмиш нювлярдя ( чяйирткя, бюйцк юлчцляря малик олан 
таракан  нювляри,  бюъякляр,  бал  арысы,  палыд  ипяксарыйаны)  бу 
цсулдан  истифадя  етмяк  мцмкцн  олур.  Бунун  цчцн  бядянин 
юртцк  гаты  кясилир  вя  бядян  бошлуьунда  йерляшян  органлар 
тядгиг  олунмаьа  башланыр.  Бу  цсул  тялябялярдян  бюйцк 
диггят,  ещтийат  вя  чох  заман  сябирли  олмаьы  тяляб  едир. 
Йарма  просесиня  башламадан  яввял  тяляб  олунан  лявазима-
тын тамлыьы йохланылмалыдыр вя онлар билаваситя тяърцбя маса-
сынын цзяриндя олмалыдыр (шякил 4). 
Щяшярат  бядянинин  йарылмасы  хцсуси  габларда – диб 
щиссяси мум гаты иля юртцлмцш вя галынлыьы ентомоложи ийнянин 
батырылмасы цчцн кифайят едян йарма ляйянляриндя апарылыр. Иш 
цчцн  тяляб  олунан  алятляр  бунлардыр:  гайчы,  пинсет,  скалпел, 
йарма ийняляри, щяшяратын бядянини мум гатына бирляшдирмяк 
цчцн  лазым  олан  ади  санъаглар.  Иш  просесиндя  щяшяратын  ню-
вцндян асылы олараг, бу лявазиматын нювляри дя дяйишиля биляр. 
Ишлямя  просесиндя  тялябя,  щансы  алятин  истифадясинин  даща 
еффектив олдуьуну юзц мцяййянляшдирмялидир. 
Щяшяратын  бядяни  кясилян  заман  бязи  мягамлары 
нязяря алмаг лазымдыр. Адятян щяшяратын бядяни бел (дорсал) 
тяряфдян кясилмялидир. Беля ки, бядян гарын тяряфдян кясилдик-
дя синир зянъири зядяляня биляр. Йарма, тохумалары щяля бярки-
мямиш  вя  асанлыгла  кясиля  билян,  йениъя  юлдцрцлмцш  (хлоро-
форм вя йа «су иля наркоз» васитясиля) щяшярат цзяриндя даща 
асанлыгла  йериня  йетирилир.  Лакин  лабораторийа  шяраитиндя  (хц-
сусян  дя  гыш  тяърцбяляри  заманы)  чох  вахт  истянилян  щалда 
ъанлы щяшярат олмур, она эюря дя чох вахт анатомик хцсусий-
 
16
йятляр спиртдя вя йа формалиндя фикся олунмуш материал цзя-
риндя апарылыр. 
 
           А 
                                                             
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
Б 
 
Шякил 4. Ентомоложи  обйектин 
йарылмасы  заманы  тяляб  олунан 
алятляр: 
А  -
 
лоток(габ);  скалпел; 
йарма ийняси; пинсет; ял лупасы; Пет-
ри  габы;  яшйа  шцшяси;  юртцъц  шцшя; 
шцшя чубуг; ФО флаконлары (обйек-
тин  йерляшдирилмяси  цчцн);  дамъы-
лайыъы; филтр каьызы; Б – йарылмыш щя-
шярат (аь рянэли пий ъисми тямизлян-
мямиш щалда)
 
 
 
Ентомоложи  обйект  йарылмадан  яввял  мумлу  ляйянин 
дибиня  санъаглар  васитясиля  бяркидилир.  Бу  заман  санъаглары 
бир  гядяр  яйри  истигамятдя  санъмаг  лазымдыр  ки,  ишя  мане 
олмасынлар.  Сонрадан  тядгиг  олунан  щяшяраты  ещтийатла, 
дорсал щиссядян кясмяйя башламаг лазымдыр. Кясилмиш щяшя-
рат  бядянини  там  шякилдя  су  иля  юртмяк  тяляб  олунур.  Йяни 
органлара  бахыш  вя  йарманы  су  алтында  щяйата  кечирмяк 
лазымдыр. Иш  яснасында су буландыгъа, сцзцлцр, йениси иля явяз 
олунур (шякил 5). 

 
17
 
 
Шякил 5. Бал  арысынын  йарылма  гайдасы: 
А – гыздырылмыш  яйри  метал 
чубуг  вя  йа  пинсетля  (а)  ляйянин  ортасында  мум  яридилир;  габагъадан 
ганадлары  вя  ятрафлары  кясилмиш  бал  арысынын  бядяни  йарыйы  гядяр  щямин 
мум  дялийиня  гойулур  (B)  ;    Ъ-Ч-  бел  тяряфдян  башын  янсяси,  дюш  вя 
гарынъыьын тергитляри кясилмяйя башланыр (пунктирля эюстярилмишдир)
 
 
Тядгиг олунан обйектин шяклинин чякилмяси 
 
Бюйцк  ихтисас  тяърцбяси  мяшьяляляриндя  бир  гайда 
олараг,  тядгигат  обйекти  олан  щяшяратын  шякли  чякилмялидир. 
 
18
Бу  просес  тядриъян  тялябядя,  эюрдцйц  обйектин  гурулуш 
хцсусиййятлярини  юйрянмякля  йанашы,  дцшцнцлмцш  шякилдя 
онларын  йерляшмя  хцсусиййятляри,  функсионал  мащиййяти 
щаггында  биликлярини  мющкямлятмяйя  имкан  верир.  Тялябя 
баша дцшмялидир ки, онун чякдийи ентомоложи шякил сянят ясяри 
дейил,  техники  шякилдир,  йяни  щямин  просесдя  ондан  форма, 
органларын  нисбяти,  йерляшмяси  вя  с.  дцзэцн  ифадя  олунмасы 
тяляб олунур. График форманын гейд олунма просеси, маэистр 
тялябядя  эюрдцйц,  йадда  сахладыьы,  дярс  просесиндя  гав-
радыьы  гурулуш    хцсусиййятлярини  даща  йахшы  тядгиг  етмяйя 
имкан верир (шякил 6). 
 
Шякил 6. Ъанлы  щяшяратын  бир  нечя  санийя  ярзиндя  позасы  вя 
«характери» ни якс етдирян чякилиш контурлары
 
 
Илкин  мярщялядя  тялябя  контур  чякилишиня  диггят 
йетирмялидир.  Щямин  чякилиш,  тез  йериня  йетириля  билян 
гейдиййат  формасыдыр  вя  бу  заман  дягигликля  органларын 
эюрцнцшцнц  фикся  етмяк  тяляб  олунмур.  Контур  чякилиш  бит-
дикдян  сонра  морфоложи-анатомик  характерли  чякилишя  баш-
ламаг лазымдыр.  
Щяшяратын  гурулушунун  мцряккяблийиндян  асылы 
олараг,  онун  органларынын  деталлары  гейд  олунмалыдыр.  Йяни 

 
19
йармадан сонра обйект дягигликля тядгиг олундугдан сонра 
цмуми контур чякилиши апарылмалы, сонрадан ися йалныз йахшы 
эюрцнян  органларын  чякилишиня  башламаг  лазымдыр  (мясялян 
щязм  системи  органлары).  Чякилиш  просесиндя  тялябя  бу  вя  йа 
диэяр системин органларыны эюрмцрся вя йа тапмайыбса,  ону 
чякмямялидир . 
Чякилиш  микроскопик  препаратдан  апарылырса,  илкин 
мярщялядя  обйектин  цмуми  эюрцнцшц  гейд  олунмалыдыр 
(микроскопун айдын эюрцнян обйективи алтында). Ясасян бу, 
лупа вя йа кичик бюйцдцъц алтында щяйата кечирилир. Бу заман 
пропорсийалара  хцсуси  диггят  йетирмяк  лазымдыр.  Тялябя 
микроскопик  обйекти  чякян  заман  ону  там  формада 
эюрмцрся,  бу  пропорсийалара  диггят  йетиря  билмяз  вя 
нятиъядя,  щяшяратын  органлары  йа  бюйцк,  йа  да  бядян 
юлчцляриня нисбятян щяддян артыг кичик чякиляъякдир. 
Тядгиг  олунан  щяшяратын  шякли  чякилян  заман  вахта 
гянаят  етмяк  цчцн  просеси  садяляшдирмяк  олар.  Мясялян, 
ятрафлары йалныз бир тяряфдян чякмяк мцмкцндцр вя йа кясийи 
чякян заман онун бир щиссясини гейд етмяк кифайятдир. 
Обйектин  шякли  чякилдикдян  сонра  мцтляг  мцфяссял 
шякилдя  гейдиййат  апарылмалыдыр.  Яэяр  гейдиййат  цчцн 
мялумат  чох  дейился,  шякилин  йанында  эюстяриля  биляр.  Лакин 
органларын  гейдиййаты  чохдурса,  онлар  нюмрялянмяли  вя 
сонрадан, айры колонларда йазылмалыдыр. Органларын шяклинин 
цзяриндя гейдиййат апармаг олмаз. 
 
Ентомоложи микропрепаратларын щазырланма 
 
 
     техникасы 
 
Бюйцк  ихтисас  тяърцбя  мяшьяляляриндя  чох  вахт 
мцхтялиф  ентомоложи  обйектлярин  микропрепаратларындан 
истифадя  олунур.  Тядрис  просесиндя  щяр  щансы  бир  щяшярат  ню-
вцнцн  морфоложи  вя  анатомик  гурулуш  хцсусиййятляри  тядгиг 
олунан  заман  тялябянин  препарат  щазырланма  техникасы  иля 
танышлыьы  вя  юзцнцн  щямин  просеся  йийялянмяси  ваъибдир. 
 
20
Адятян ентомоложи обйектин характериндян асылы олараг, мц-
вяггяти вя ещтийат цчцн (даими) микропрепаратлар щазырланыр. 
Мцвяггяти препаратлар, бир гайда олараг, мяшьяляляр-
дя истифадя олунмаг цчцн щазырланыр. Мясялян, чох кичик  юл-
чцляря малик олан щяшярат нювцндян вя йа онун пянъяси вя с. 
органындан  бир  дамла  суда  яшйа  шцшяси  цзяриндя  щазырланыб 
микроскоп алтында бахылыр. 
Ещтийат  (даими)  микропрепаратларын  щазырланмасы 
даща мцряккябдир. Адятян кафедраларда бу препаратлардан 
чохлу сайда истифадя олунур. Лакин маэистр тялябянин микро-
препаратларын щазырланмасы техникасына йийялянмяси цчцн он-
ун бу ишя ъялб олунмасы ваъибдир. 
Даими микропрепаратларын щазырланмасында чох вахт 
микротом кясикляриндян истифадя олунур (шякил 7). 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
                 
А
                                 
Б 
 
Шякил 7. Сан микротому: А –(
1- микрометрик винт; 2- обйектин ютцрцл-
мя  механизми; 3- обйекти  сахлайан  ясасынын  милини  фикся  едян  винт; 4- 
обйекти сахлайан ясасын мили);  Б – Миъротом  ЩМ 200 
 
Микротом, фикся олунмуш вя йа фикся олунмамыш био-
ложи  тохумалардан 1-50 микрон  галынлыгда  кясиклярин  щазыр-
ланмасы  ъищазыдыр.  Бу  ъищазын  металик  бычаглары  олур  вя  щя-
мин  бычаглара  материалын  ютцрцлмя  хцсусиййятиня  эюря  фярг-
лянян мцхтялиф микротомлар мювъуддур. Бычаглары шцшя вя йа 
алмаз  мяншяли  олан  микротомлар  да  вардыр  (криоултрамик-
ротомлар).  Обйекти гыса мцддят ярзиндя тядгиг етмяк тяляб 

 
21
олундугда,  дондуруъу  микротомдан  истифадя  олунур  ки, 
онун  дондуруъу  масасы  олур.  Щямин  масанын  цзяриндя 
ентомоложи обйект бяркидилир. 
Микротомун ясас щиссяляри бунлардыр: массив, станина 
адланан  корпус,  обйекти  ютцрян  микрометрик  винтли  ме-
ханизм, обйекти сахлайан ( маса) вя микротом бычаьыны сах-
лайан  елементляр.  Сан  микротомларында  станинанын  йухары 
щиссясиндя ъилаллайыъы мцстявиляр йерляшир ки, онларын цзяриндян 
массив,  щярякятли  «суппорт»  сцрцшцр.  Суппорта  бычаьын  дяс-
тяйи бирляшир ки, бу механизм бычаьын мцхтялиф истигамятлярдя 
щярякят  етмясиня    имкан  верир.  Бычаьы  архайа  доьру  сона 
гядяр чякдикдя йарымавтоматик механизм ишя дцшцр. Бу ме-
ханизм,  масаны  сахлайаны  габагъадан  гейд  олунмуш  миг-
дарда микронлар сявиййясиня галдырыр. Обйекти сахлайан еле-
мент винтлярля тяъщиз олунмушдур ки, бу, блоку тяляб олунан 
вязиййятдя  (йяни  бычаьын  щярякят мцстявисиня  нисбятян  лазым 
олан сявиййядя) бяркитмяйя имкан верир. Бязян  сан микро-
томларында  бычаг  щярякятсиз  бирляшмиш  олур  вя  ъилалланмыш 
мцстяви цзяриндя обйект вя ону сахлайан дястяк щярякят ет-
дирилир.  
Адятян парафин блоклардан кясиляр щазырламаг цчцн 2 
тип микротомдан – сан вя ротасион микротомдан истифадя ол-
унур. Чох вахт лабораторийаларда мяшьяля заманы сан мик-
ротомундан  истифадя  олунур,  чцнки  о,  щям  парафин,  щям  дя 
селлоид блоклары ялдя етмяйя имкан верир. 
Кясикляри щазырлайан заман онлары микротомун быча-
ьындан фырча вя йа йарма ийняси васитясиля эютцрмяк лазымдыр. 
Иш битдикдян сонра микротомун бычаьы бензин, петролей ефири 
вя йа ксилол иля исланмыш парча васитясиля силинмялидир. 
Бычаьын  цзяриндян  эютцрцлмцш  кясикляри  дистилля  суйу 
олан стякана йыьмаг лазымдыр (бязян яшйа шцшясинин цзяриндя 
гуру щалда йапышдырыла билирляр).  
Суйа кечирилмиш кясиклярин даща йахшы дцзялмяси цчцн 
суйу 37-40
0
 гыздырмаг лазымдыр. Бу заман парафин яримядян 
кясийин дцзялмясиня фикир верилмялидир. Дцзялмиш кясик сонра-
 
22
дан яшйа шцшяси цзяриня гойулур. Бязян кясикляри бирбаша яшйа 
шцшясинин цзяриндя олан 2-3 дамла суйун ичярисиня кечирирляр. 
Бу  заман  кясиклярин  дцзялмяси  цчцн  шцшяни  гыздырмаг 
(гыздырыъы маса вя йа спиртовка васитясиля) кифайят едир.  
Яшйа  шцшяси  цзяриндя  кясик  дцзялдикдян  сонра  онун 
ятрафындакы суйун артыьы филтр каьызы иля чякилир вя щямин яшйа 
шцшяляри  бир  эеъялик 37
0
-дя  термостатда  сахланылыр.  Сонрадан 
щямин кясикляр рянэлянир. 
Кясикляр  яшйа  шцшяляри  цзяриня  йапышдырылмадан  яввял 
онлар тямизлянмялидирляр. Бу мцряккяб просес олуб, ики мяр-
щялядя  щяйата  кечирилир:  йаьсызлашдырылма  вя  адгезив  юртцйцн 
чякилмяси.  Лакин  бязян  йаьсызлашдырылмасына  ещтийаъ  олма-
йан щазыр яшйа шцшяляри истещсал едирляр. Бу заман щямин яшйа 
шцшяляринин  пакетинин  цзяриндя  «pqe cleaned»  маркасы  гейд 
олунур. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
Шякил 8. Яшйа шцшяляринин тямизлянмяси вя йаьсызлашдырылмасы 
 
Яшйа  шцшяляринин  тямизлянмяси  вя  йаьсызлашдырылмасы. 
Шцшяляр  яввял  исти  сабунлу  суда  йуйулур,  дистилля  суйунда 
йахаланыр  вя  гурудулур.  Щямин  шцшяляр  каьыза  бцкцлцб  иш-
лянмя  просесиндя  истифадя  олунур.  Тяърцбяляр  башланмамыш-
дан яввял тяляб олунан гядяр яшйа шцшяси эютцрцлцб ичярисиндя 
Никифоров  майеси  (етанол-ефир 1:1) олан  банка  вя  йа 
мющкям гапаглы флаконларда сахланылыр (шякил 8). 
Никифоров  майесинин  ичярисиндя  шцшялярин  йаьсыз-
лашмасы  баш  верир.  Шцшянин  щазырлыг  сявиййясини  мцяййян-

 
23
ляшдирмяк цчцн бир ядяд эютцрцлцр, силинир вя цзяриня бир дам-
ла дистилля олунмуш су тюкцлцр. Дамла даьылмырса, демяли щя-
ля шцшя щазыр дейил. Йалныз су дамласы яшйа шцшясинин цзяриндя 
ахдыгда, дамла шяклиндя галмадыгда, ондан кясикляри йапыш-
дырмаг  цчцн  истифадя  етмяк  олар.  Якс  щалда,  адгезивля  тя-
мизлядикдя беля, кясик шцшя цзяриня йапышмайаъагдыр.  
Лакин  мящлулларын температуру йцксяк олдугда, гя-
ляви ляйянляриндя дя кясикляр тез-тез шцшядян гопурлар. 
Адгезив  васитялярля  тямизлянмя.  Тямиз  вя  йаьсызлаш-
дырылмыш  яшйа  шцшяляри  адгезив  мящлулларла  тямизлянир.  Яшйа 
шцшяляринин  адгезив  хцсусиййятлярини  артыран  ясас 2 цсулдан 
истифадя олунур: глисеринли йумурта аьы вя желатинля ишлямя. 
Глисеринли йумурта аьы иля адгезив ишлямя. Йумуртанын 
аьы  шпател  иля  кюпцкляняня  гядяр  чырпылыр  вя  сонрадан 
эенишмясамяли  филтирдян  сцзцлцр.  Филтр  яввял  дистилля  олунмуш 
су  иля  исладылыр.  Филтрасийа 24 саат  чякир.  Филтирдян  кечмиш 
йумурта  аьына  ейни  щяъмдя  глисерин  гатылыр,  гарышдырылыр  вя 
цзяриня бир дилим (чцрцмямяси цчцн) камфора (кафур йаьы) вя 
йа  тимол  гатылыр.  Бу  мящлулу  сойудуъуда  сахламаг  даща 
йахшыдыр. 
Щямин  мящлул  иля  йаьсызлашдырылмыш  яшйа  шцшяляринин 
ишлянмяси бу гайда иля щяйата кечирилир. Етанол вя йа Никифо-
ров майесиндян чыхарылмыш яшйа шцшяляри гуру парча иля силинир 
вя  папкалара  йыьылыр.  Щяр  шцшянин  цзяриня  йарма  ийнясинин 
уъунда  вя  йахуд  шцшя  чубугла  зцлаллы  глисерин  дамласы  го-
йулур.  Бармаьын  уъу  иля  бу  дамъы  шцшянин  цзяриндя  йайылыр. 
Сонрадан  щямин  шцшяляр  гуру  мцщитиндя  гуруйур  (отагда) 
вя 15-20 дяг термостатда 50-60
0
Ъ гыздырылыр. Йалныз бундан 
сонра  кясикляри  щямин  яшйа  шцшяляринин  цзяриня  йапышдырмаг 
олар. 
Желатинля  ишлямя.  Бунун  цчцн 2,5 г  желатин 500 мл 
дистилля  суйунда  даима  гарышдырылмагла  вя 50
0
Ъ-дя  гыздырыл-
магла  щялл  едилир.  Желатин  щялл  олундугдан  сонра  онун  цзя-
риня 0,25 г  хромокалий  квассы  ялавя  едилиб  гыршдырылыр.  Отаг 
температурунда сойудугдан сонра 4
0
-дя (сойудуъуда) сах-
 
24
ланылыр. Ишя башламадан яввял щямин мящлул 60
0
Ъ-дя гыздырылыр 
вя филтрдян сцзцлцр. Бу мящлула тямизлянмиш яшйа шцшяляри йер-
ляшдирилир, чыхардыгдан сонра бир саата гядяр 60
0
Ъ-дя гуруду-
лур. Сойудугдан сонра щямин шцшяляр гутуларда сахланылыр вя 
лазым олдугъа ишлядилир: 
 
Яшйа шцшяляринин сахландыьы гуту 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
Кясиклярин рянэлянмядян яввял вя сонракы емалы 
 
Адятян кясиклярин цзяри парафинли олдуьу цчцн суйу вя 
спиртдя щялл олан бирляшмяляри кечирмирляр, йяни рянэляйиъилярин 
чохусу  кясийин  дахилиня  кечя  билмир.  Она  эюря  дя  парафин 
рянэлянмядян яввял йох едилмялидир. Бу просес депарафинляш-
мя вя рещидротасийа адланыр. 
Парафини щялл едян мящлул кими орто-ксилолдан истифадя 
олунур. Рещидротасийа ися етанолла апарылыр. Мясялян, Сиэма 
фирмасынын  мяслящятиня  эюря,  депарафинляшмядян  яввял  яшйа 
шцшялярини термостатда 56
0
Ъ-йя гядяр гыздырмаг лазымдыр. 
Г.А.  Меркуловун  мяслящятиня  эюря,  ксилолун  токсики 
бухарларындан  мцщафизя  мягсядиля,  кясиклярин  депарафин-
ляшмяси  вя  рещидратасийасы  заманы  ксилол  вя  спирти  бирбаша 
яшйа  шцшясинин  цзяриня  тюкмяк  лазымдыр.  Бунун  цчцн  узун-
сов  аьзы  кип  баьланан  стяканлардан  истифадя  етмяк  даща 
мягсядяуйьундур (шякил 8). Бунун цчцн 5 стякан эютцрмяк 
кифайятдир. Онлардан икисиня орто-ксилол, диэярляриня ися 96%-
ли  етанол (2 стякан)  вя 80%-ли  етанол (1 стякан)  тюкцлцр. 
Ксилолун  щяр  порсийасында  яшйа  шцшяляри 3-5 дяг  сахланылыр. 

 
25
Шцшяляри диэяр стяканлара кечиряркян ещтийатлы олмалы вя яввял, 
филтр  каьызы  цзяриня  кечирилмялидир.  Бу  заман  мящлулларын 
чирклянмясинин  гаршысы  алынмыш  олаъагдыр. 80%-ли  спиртдян 
шцшяляр 5 дяг  мцддятиня  дистилля  олунмуш  суйа  гойулур. 
Бунунла  да  рещидратасийа  просеси  битир  вя  кясиклярин  рянэ-
лянмяси башланыр. 
 
Дещидратасийа, шяффафлашма вя рянэлянмядян сонра 
                 кясиклярин йерляшдирилмяси 
 
Рянэлянмя  просеси  битдикдян  сонра  ялдя  олунмуш 
препаратдан  микроскопийа  мягсядиля  истифадя  етмяк  олар. 
Бунун  цчцн  донмуш  шяффаф  мцщитляри  (мящлулдур)  рянэлян-
миш кясийин цзяриня гойулур вя 22 мм узунлугда олан юртц-
ъц шцшя иля гапаныр: 
 
Юртцъц шцшянин 45

буъаг алтында 
 гапанмасы 
 
 
 
Бу цсулла щазырланмыш препарат узун мцддят архивдя 
сахланыла биляр. Яэяр кясийин цзяриня истифадя олунмуш мцщит 
суда  щялл  оландырса,  онда  рянэлянмиш  препаратларын  цзяриня 
щямин мцщити йуйулмадан дярщал сонра чякиб, юртцъц шцшяни 
гоймаг  лазымдыр.  Щямин  мцщит  кясик  цзяриндя  дондугдан 
сонра  она  микроскоп  алтында  бахмаг  олар.  Мясялян,  ади 
суда щялл олан мцщит кими глисеринли-желатини эюстярмяк олар. 
Парафинли  кясикляри  мцщит  дахиля  кечирмяк  цчцн  чох 
вахт  тябии  гятранлардан  (канада  вя  йа  пихт  балзамы, 
даммарлак)  вя  синтетик  мцщитлярдян  (биомаунт,  полистирол, 
капрат селлцлоза, ДПХ, пермаунт) истифадя едилир. Бунлар су-
да  щялл  олмур,  лакин  ксилолда  щялл  олурлар.  Тяърцбя  мяшья-
ляляриндя даща чох канада балзамы вя полистиролдан истифадя 
олунур. Бу мцщитляря кясикляр дахил едилмямишдян яввял 80%, 
96%  вя 100% -ли  етанолларда  етанол-ксилол 1:1 –дя 1-3 дяг 
 
26
сахланмалыдыр.  Сонрадан  шяффафлашмаг  цчцн 1-3 дяг 
мцддятиндя 2 порсийа орто-ксилолда сахланылмалыдыр. Щяр 40-
50  препаратдан  сонра  ксилоллар  вя  спиртляри  дяйишмяк  лазым-
дыр.  
Полистириолдан  гапайыъы  мцщит  щазырландыгда 70 мл 
орто-ксилол, 30 г  полистирол, 6 мл  дибутилфталат  вя  йа 70 мл 
орто-ксилол, 25 г  полистирол  вя 5 мл  дибутилфталатдан  истифадя 
олунур. Полистиролун тез бир заманда щяллиня наил олмаг цчцн 
гарышыьы  аьзы  кип  баьланмыш  габда  термостата (37
0
Ъ)  йер-
ляшдирмяк лазымдыр. 
Щематоксилин  вя  еозин  иля  рянэлянмиш  даими  препа-
ратларын  узун  мцддят  сахланылмасы  цчцн  канада  балзамына 
цстцнлцк  верилир.  Анилин  рянэляйиъиляри  иля  рянэлянмиш  препа-
ратлары  ися  полистирол  вя  йа  щяр  щансы  бир  башга  нейтрал 
мцщитдя  йерляшдирмяк  тяляб  олунур.  Беля  ки,  онлар  канада 
балзамында вя йа башга тябии гятранларда чох тез бир заман-
да рянэсизляширляр. 
 
Щяшяратларын тотал препаратларынын щазырланма 
 
 
         цсуллары 
Щяшяратын  тотал  препаратлары  ясасян 2 цсулла  щазыр-
ланыр. Биринъи цсулда щяшяратын органлары мясялян, ятрафлары вя 
йа башы 10%-ли поташа(калиум-карбонат –К
2
ЪО
3
 сыхлыьы 2,29 
г/см
3
; мол.чякиси 138,205 г/мол) салыныр. Бу заман йумшаг 
тохумалар щялл олур. Бу тясир, щяшяратдан асылы олараг, бир не-
чя  саатдан  бир  нечя  эцня  гядяр  давам  едя  билир.  Просеси 
гыздырмагла  тезляшдирмяк  мцмкцн  олса  да  мяслящят  дейил. 
Сонрадан щямин органлар су иля йуйулур вя суда да сахланы-
лыр. Органын дахилиндя олан мющтявиййаты чыхармаг цчцн он-
ун цзяриня ещтийатла басмаг кифайятдир. 
Лакин  яэяр  препарат  бцтюв  щяшяратдан  щазырланырса, 
баш  вя  гарынъыьы  айырмамаг  цчцн  ещтийатлы  олмаг  лазымдыр. 
Лазым  эялся  бир  гядяр  анусу  эенишляндирмякля,  гырынъыьын 
цзяриня  басылмалы  вя  дюш  щиссясинин  мющтявиййатыны  ися  га-
рынъыг васитясиля хариъя чыхармаг мцмкцндцр. Сонрадан ади 

 
27
су  иля  йумаг  вя  бир  нечя  дяфя  дистилля  олунмуш  суда  йаха-
ламаг лазымдыр. Йуйулдугдан сонра щямин щяшяратын препа-
раты 90%-ли спиртдя ( 2 дяфя щяр саатдан бир олмагла) сахланы-
лыр вя сонрадан ксилолда сахланылыр (аз бир мцддятдя) вя бал-
замда монтировка апарылыр.  
Икинъи  цсул.  Бцтюв  щяшярат  вя  йа  онун  щяр  щансы  бир 
органы хлор-фенолда бир нечя дягигя гыздырылыр йахуд бир нечя 
саат  сойугда  сахланылыр.  Бу  заман  бир  нечя  дяфя  хлор-фенол 
дяйишдирилир. 
Обйект яшйа шцшяси цзяриня кечирилиб, хлор-фенолун ар-
тыьы  йох  едилир  вя  балзамда  монтировка  олунур.  Лакин  мо-
нтировкадан юнъя ксилолдан да кечирмяк йахшы оларды. Бу за-
ман препарат даща йахшы гуруйур. Хлор-фенол: 2 щисся хлор-
щидрат  вя 2 щисся  кристалик  карбол  т-нун  гарышыьындан  иба-
рятдир ки, ону ещтийатла, майеляшяня гядяр гыздырырлар. Бу га-
рышыг ентомоложи  обйекти сусузлашдырыр вя шяффаф едир. Щямин 
гарышыг су иля олдуьу кими, балзамла да гарыша билир. 
Икинъи цсулун чатышмайан тяряфи – алынан препаратларын 
лазымы гядяр назик, йасты олмамасыдыр (поташла ишлямядя пре-
паратлар даща йахшы алыныр). 
Щяшяратын ганадларыны поташын тясириндян горумаг ла-
зымдыр. Поташла йалныз сяртганадлылар (Coleoptera) вя йарым-
сяртганадлыларын  (Hemiptera)  ганадларыны  ишлямяк  олар. 
Ганадлы  щяшяратларын  чохусунун  ганадларыны  хлор-фенол  вя  
щяшяратын  трахейасындан  чыхан  бу  щавайа  мцтляг  спиртля (2 
дяфя  дяйишмякля),  сонрадан  ися  ксилолла  тясир  етдикдя  сусуз-
лашдырмаг  олар.  Щяшяратын  гуру  ганадларынын  монтировкасы 
асандыр:  онлары  ксилола  батырыб,  щаваны  йох  едиб,  балзама 
гоймаг кифайятдир.  
Щяшяратларын  пулъугларыны  да  бу  йолла  ишляйирляр:  лювщя 
цзяриня 1 дамъы  ксилол  тюкцб,  ганадын  цзярини  гашымаг  ла-
зымдыр. Ондан айрылан пулъуглар ксилола дцшцр вя сонрадан 1 
дамла  балзам  ялавя  олунур,  цзяри  юртцъц  шцшя  иля  гапаныр. 
Ганадын диэяр щиссялярини йа балзамда, йа да гуру щалда – 
 
28
гара фонда (якс олунан ишыгда тядгиг етмяк цчцн) юйрянмяк 
мцмкцндцр. 
Бязян  щяшяратын  хитинли  юртцйцнц  йох  етмяк  мцмкцн 
олмур  вя  йа  мягсядяуйьун  дейил.  Онда  щямин  обйект  тез 
кечян майелярдя фикся олунмалыдыр. Беля фиксаторлардан Пет-
рункевич,  Жилсон,  Карнуа,  Буена  майелярини эюсярмяк  олар. 
Чох  вахт  онлар  гыздырылмыш (60-80
0
Ъ)  щалда  тядбиг  олунур. 
Лакин  тядгигат  обйектинин  бядян  диварыны  кясмяк  вя  йа 
дешмяк (бир нечя йердян) мцмкцндцрся, фиксасийа цчцн ади 
фиксаторлардан истифадя мцнасибдир. 
Т р а х е й а  с и с т е м и. Щяшяратын трахейа системинин 
инйексийасы цчцн фярдляри туш олан габа салырлар, бязян буну 
етмямишдян  яввял  онларын  ганадларыны  да  кясирляр.  Щямин 
габ  аспиратор  васитясиля  су  кранына  бирляшдирилир.  Су  ахдыгъа 
щава,  аспиратор  васитясиля  кянарлашыр  вя  вакууму  йарадыр. 
Щяшяратын трахейаларындан чыхан бу щава туш иля явяз олунур. 
Трахейа  системинин  кичик  шахялярини  асанлыгла  Dytiscus 
marginalis  бюъяйинин  сцрфяляриндя  ашкар  етмяк  олар.  Бунун 
цчцн ъанлы сцрфяляр 2 щяфтялик бюйцк, лакин аьзы кип баьланан 
вя  ичярисиндя  осмий  туршусу  (осмий  металынын  йандырылмасы 
йолу  иля  ялдя  олунан  осмиум  тетроксиддир – ОсО
4
,  рянэсиз 
майедир,  инсанын  эюзляри,  дяриси  вя  няфяс  йоллары  цчцн 
токсикидир,  асанлыгла  сифаришля  алына  билир)  габда  сахланылыр. 
Сцрфялярин  мядяси  вя  пий  ъисминдян  бир  щисся  айрылыр  вя  яшйа 
шцшясинин  цзяриндя  дцзялиб,  цзяриня  глисерин  ялавя  едилир. 
Осмий  т-нун  тясири  бядян  майесинин  трахеоллара  кечмясинин 
гаршысыны  алыр,  она  эюря  дя  орада  олан  щава  эюрцня  билир. 
Трахеоллара  осмий,  диэяр  тохумаларда  олдуьу  кими  дейил, 
нисбятян  чятинликля кечя билир. 
Бязян  трахеоллары  Щолжи  методу  иля  хром-эцмцш  препа-
ратынын  тясириля  юйрянирляр.  Йахуд  буну  садяъя  олараг,  ади 
спиртдя  трахеоллары  фикся  етмякля  вя  сонрадан  глисеринля  ишля-
йиб,  йумагла  щяйата  кечирмяк  олар.  Лакин  бу  заман  ону 
хлорлу гызыл мящлулунда 1 саат сахлайыб, 6%-ли гарышга туршу-

 
29
сунда 10 эцн сахламаг тяляб олунур. Щямин методу аз исти-
фадя едирляр. 
С и н и р  с и с т е м и. Щяшярат бейнини бу гайдада тядгиг 
етмяк  олар.  Бейин 10%-ли  формалиндя 4-20 саат  (чох  вахт 6 
саат)  фикся  олунур.  Сусузлашдыгдан  сонра  ксилолда  шяффаф-
лашдырылыр  вя  парафиня  гойулур.  Еозиндя  о, 20-30 санийя  сах-
ландыгдан сонра 30 санийя квасс щемотоксилиндя галыр вя  су 
иля йуйулур, фосформолибден т-на (1%-ли) 2-3 дяг гойулур: 
 
 
 
 Фосформолибден т-су молибден т-на нисбятян даща эцъ-
лц оксидляшдириъи хцсусиййятя маликдир. Сонрадан су иля йуйул-
муш обйект (бейин) 6 санийя мцддятиндя Маллори  гарышыьын-
да(чохрянэли рянэлянмя цсулу)  рянэлянир: 
 
Маллори  гарышыьында  рянэлянмиш  йумурталыьын 
бир щиссяси 
 
Маллори мящлулуну щазырламаг цчцн 3 
мящлул  тяляб  олунур: 1) 0,1%-ли  фукси-
нин  су  мящлулу; 2) 1%-ли  фосформо-
либден т-нун мящлулу вя 3) анилин- эюй, 
нарынъы Э, гузугулаьы т-су. Бунун цч-
цн 100 мл дистилля олунмуш суда 0,5 г 
анилин+2  г  нарынъы  Э+2  г  гузугулаьы 
т-су  гарышдырылыр.  Маллори    гарышыьындан 
даща  чох  щоллоэен  лифлярин  рянэлянмяси  заманы  истифадя  олу-
нур.  
Беляликля, 6 дягигя Маллори мящлулунда рянэлянян бе-
йин чыхарылыр, йуйулур, сусузлашыр (йухарыда бу просесляр гейд 
олунмушдур),  шяффафлашыр  вя  балзама  гойулур.  Йахуд  да 
материал  формалиндя  фикся  олундугдан  сонра  суда  йуйулур 
вя 5%-ли  ЪуСО
4
  мящлулунда 24 саат  сахланылыр,  йуйулур, 
сусузлашыр  вя  парафиня  гойулур.  Кясикляри  бу  гайдада  рянэ-
 
30
лямяк  лазымдыр: 10%-ли  фосформолибден  т-су 1 мл,  кристалик 
щематоксилин 1 г, хлоралщидрат 6-10 г вя су 100 см
3

Кяпяняк  вя  бюъяклярин  ъанлы  сцрфялярини  рянэлямяк 
цчцн  метилен-эюйцн (3%-ли  НаЪл  мящлулунда)  мцхтялиф  га-
тылыгларында  мящлулдан  кичик  шпритс    иля  инйексийа  олунурлар. 
Ийня  щиподерма  вя  язяля  гатындан  кечмялидир,  лакин  щязм 
системиня  кечмямялидир  вя  рянэ  мящлулу  щяшяратын  бцтцн 
сегментлярини рянэлямялидир. Инйексийадан 2-4 саат сонра щя-
шярат ъанлы галмалыдыр. Йарылдыгдан сонра синирлярин эюй рян-
эя бойандыьы айдын эюрцнцр. 
Й у м у р т а  в я  е м б р и о н л а р . Йумурталардан 
препарат  щазырламаг  цчцн  онлары  исти  фиксаторда (60-80
0
Ъ) 
фикся  етмяк  лазымдыр.  Йумурталары  сойутдугдан  сонра 
обйекти 75-80%-ли спиртдя сахламаг тяляб олунур. Лакин йу-
мурталар  сузулашдырылмадан  вя  парафиня  гойулмадан  яввял 
онун хорионуну йох етмяк лазымдыр.  
Щяшяратларын ъинси системиндян препаратларын щазырлан-
масы бу гайда иля щазырланыр. Щяшяратларын имаголары, мяся-
лян,  таракан,  кяпяняклярин  йеткин  фярдляри  габагъадан  ефир 
бухары вя йа хлороформла юлдцрцлцр. Сонрадан йарма ийняси 
вя йа эюз пинсетинин уъу иля имагонун сон гарынъыг буьуму 
тутулараг  дартылыр.  Бу  заман  ъинси  систем  там  шякилдя 
чыхарылыр вя 15-20 дяг мцддятиндя 20%-ли КОЩ мящлулунда 
гайнадылыр. Бу заман йумшаг тохума, йяни язяля лифляри яри-
йир вя сиркя т-су (бир нечя дамла) гатылмыш суда йуйулур. Пре-
парат  щазырланмаьа  башланыр: 1) канада  балзамы  цсулу  иля 
ишлядикдя сусузлашма 10-40 дяг спиртля, шяффафлашма ися михяк 
йаьы  вя  йа  ксилолла (5-15 дяг)  апарылыр; 2) глисеринли-желатинля 
ишлядикдя  ися  сусузлашма  вя  шяффафлашма  гарышдырылмамыш 
глисериндя апарылыр; 3) гуммиарабик гарышыгла ишлядикдя емал 
просеси апарылмыр. Щазырланмыш препарат мцвяггятидирся, 1:1 
нисбятиндя  глисерин  спирт  мящлулу (1-2 дамла)  яшйа  шцшяси 
цзяриня гойулмуш органын цзяриня тюкцлцр вя юртцъц шцшя иля 
гапаныр,  микроскоп  алтында  тядгиг  олунур.  Лакин  ещтийат 
микропрепараты  (даими  микропрепарат)  щазырланырса,  орган 

 
31
яшйа шцшяси цзяриндя дцзялир, коллоид вя йа селлоидля (йумурта 
зцлалындан  да  истифадя  етмяк  олур)  йапышдырылыр,  цзяри  юртцъц 
шцшя иля гапаныр. 
Пий ъисми. Мяшьяля дярсляриндя конкрет нювцн щалынын 
гиймятляндирилмяси  заманы  пий  ъисминин  вязиййяти  мцяй-
йянляшмялидир.  Бунун  цчцн  хлороформ  иля  щярякятсизляшдирил-
миш ентомоложи обйект  (сцрфя, пуп вя йа гышлайан формалар-
да  мясялян,  чяйирткянин  йеткин  фярди)  йарылмалы  вя  МБЪ-9 
микроскопунун  васитясиля  пий  ъисминин  инкишаф  сявиййяси 5-
баллыг шкала иля дягигляшдирилмялидир: 
Пий ъисминин морфометрик эюс-
тяриъилярини  тядгиг  етмяк  цчцн 
пий  ъисминин  йерляшдийи  гарын-
ъыг нащиййяси айрылмалы вя12%-
ли  формалин  мящлулунда(0,1М 
фосфат буфериндя – пЩ=7,4) 2-
3  щяфтя  сойудуъуда  сахланыл-
малыдыр. Щямин мцддят ярзин-
дя  фиксяедиъи  мящлул 2-3 дяфя 
дяйишилмялидир. Мцддят кечдикдян сонра пий ъисми гарынъыьын 
хитин юртцйцндян айрылыб, тязя щазырланмыш фиксяедиъи мящлула 
гойулмалыдыр.  Сонрадан  пий  ъисмини 50%-ли  КОЩ  мящ-
лулунда 18-24 саат (+4
0
  Ъ  –дя,  йяни  сойудуъунун  цст 
мяртябясиндя)  инкубасийа  едилмялидир.  Инкубасийа  мярщяляси 
кечдикдян  сонра  препараты  бюйцк  щяъмдя  дистилля  олунмуш 
суда, 2 сутка  ярзиндя  сойудуъуда  сахламаг  лазымдыр. 
Тядгигат башламадан яввял, щямин препарат 1-2 саат ярзиндя 
 
32
отаг температурунда сахланылмалыдыр, суйу ахыдылыб, 8-10 мл 
щяъминдя йениси (Щ 
2
О) иля явяз олунмалыдыр. Сонрадан асылы 
вязиййятдя олан пий ъисми Петри габына кечирилмяли, чырпылмалы 
вя щцъейряляри бу йол иля айрылмалыдыр. 

Yüklə 14,29 Mb.

Dostları ilə paylaş:
1   2   3   4   5   6   7   8   9   ...   18




Verilənlər bazası müəlliflik hüququ ilə müdafiə olunur ©www.azkurs.org 2020
rəhbərliyinə müraciət

    Ana səhifə