Yuqori samarali suyuqlik xromatografiya usuli reja: Suyuq xromatografiyaning printsipi hplc ning ishlatilish sohalari

MOBIL FAZA 
Oddiy fazali xromatografiyada odatda mobil fazaning elutsiya kuchini tartibga 
soluvchi qutbli organik birikmalarning kichik qo'shilishi bilan past qutbli organik 
erituvchilar (geksan, siklogeksan, geptan va boshqalar) ishlatiladi. Oddiy fazali 
xromatografiyada takrorlanadigan natijalarni olish uchun mobil fazada 
ishlatiladigan erituvchilarning suv tarkibini qat'iy nazorat qilish kerak. 
Teskari fazali xromatografiya organik erituvchilarni o'z ichiga olgan yoki 
bo'lmagan suvli harakatlanuvchi fazalardan foydalanadi. Organik qo'shimchalar 
odatda qutbli organik erituvchilardir (asetonitril va metanol). Ajratishni 
optimallashtirish uchun ma'lum bir pH qiymatiga ega bo'lgan suvli eritmalar, 
xususan, bufer eritmalari, shuningdek, mobil fazaga turli qo'shimchalar qo'llanilishi 
mumkin: kislotali birikmalarni ajratishda fosforli va sirka kislotalari; asosiy 
birikmalarni ajratishda ammiak va alifatik aminlar va boshqa modifikatorlar. 
Ko'chma faza komponentlari odatda 0,45 mkm dan katta zarrachalarni (yoki 
statsionar faza 2 mkm dan kichik zarrachalardan iborat bo'lsa, shuningdek, yorug'lik 
tarqalish detektori kabi maxsus detektorlar ishlatilsa, 0,2 mkm) olib tashlash uchun 
filtrlanadi. 
Ko'p 
komponentli 
mobil 
fazalarni 
tayyorlashda 
alohida 
komponentlarning o'lchangan hajmlari (agar massalar ko'rsatilmagan bo'lsa) 
aralashtiriladi. Bundan tashqari, erituvchilar o'lchash klapanlari bilan jihozlangan 
alohida nasoslar bilan ta'minlanishi mumkin, ular orqali erituvchilar kerakli 
nisbatlarda aralashtiriladi. Gaz pufakchalari paydo bo'lishining oldini olish va 
ularning detektor hujayrasiga kirishiga yo'l qo'ymaslik uchun erituvchilar odatda 
geliyni ular orqali o'tkazish, sonikatsiya qilish va on-layn membrana-vakuum 

---

modullari yordamida gazsizlanadi. 
Ko'chma fazalarni tayyorlash uchun erituvchilar odatda stabilizatorlarni o'z 
ichiga olmaydi va ultrabinafsha detektorlardan foydalanganda aniqlash to'lqin 
uzunligida shaffof bo'lishi kerak. Solventlar va boshqa mobil faza komponentlari 
maqbul sifatga ega bo'lishi kerak. Agar kerak bo'lsa, pH ni aralashmalar emas, balki 
faqat mobil fazaning suvli komponenti yordamida sozlang. Xromatografiya oxirida 
tuzlarning kristallanishiga yo'l qo'ymaslik uchun bufer yoki sho'r eritmalardan 
foydalanganda tizim suv aralashmasi va mobil fazaning oz miqdordagi organik 
qismi (5%) bilan yuviladi. 
Mobil fazalar boshqa komponentlarni o'z ichiga olishi mumkin, masalan, ion 
juftlik xromatografiyasi uchun qarshi ionlar yoki axiral statsionar fazalardan 
foydalangan holda xromatografiya uchun chiral selektorlar kiradi.