Azərbaycan respublikasi kənd təSƏRRÜfati naziRLİYİ aqrar elm və İnformasiya məSLƏHƏt məRKƏZİ

in vitro
осуществляли в соответствии с ДСТУ 7645-2014 
«Культуры овощные. Метод вегетативного размножения». В качестве 
донорского материала были использованы тетраплоидные формы арбуза, 
созданные нами в 2014-ом году путем обработки семян районированного 
сорта Макс плюс в 0,01% растворе колхицина, согласно методике [8]. Перед 
введением в культуру 
in vitro
тканей семена тетраплоидных форм замачивали 
шесть часов в воде при 30° С. Стерилизацию подготовленного таким образом 
материала проводили сначала погружая его в раствор этилового спирта с 
массовой долей 70% (на 3-10 секунд), затем в растворе гипохлорита натрия с 
массовой долей 1% в течение 25-30 минут. После этого дезинфицирующий 
раствор сливали, а растительный материал промывали 5 раз стерильной 
дистиллированной водой. Простерилизованные семена высаживали в 
пробирки, на поверхности твердой питательной среды ¼ MS [9], для 
получения ювенильных проростков. Данная среда MS также была дополнена 
витаминами (1 мг / л пиридоксина НСl, 1 мг / л никотиновой кислоты, 1 мг / л 
тиамина), 100 мг / л мезо-инозита, 20 г / л сахарозы, 6 г агар-агара. рН среды 

---

213 
5,8. Высаженный материал культивировали в темноте при температуре 24 ° С 
- 28 ° С в течение недели. В дальнейшем пробирки с семенами переносили на 
2-3 недели в специально оборудованную люминесцентными лампами 
комнату, с интенсивностью освещения 2 клк и 16-часовым фотопериодом, 
где культивировали до получения проростков. 
Для размножения тетраплоидных форм, семядоли со стерильных 2-4 
дневных проростков отделяли в условиях ламинарного бокса стерильным 
скальпелем, разделяли по одной и высаживали на индукционные среды. В 
качестве индукционных сред использовали среду MS, модифицированную
цитокининами (БАП, кинетин) и ауксинами (НУК), в концентрациях 0,5, 1, 2, 
3 мг / л. В качестве контроля использовали без гормональную питательную 
среду MS . Материал культивировали при температуре 24-26 ° С, 16-часовом 
фото-периоде, при интенсивности освещения - 5 тыс. люкс. Учеты развития 
осуществляли визуально, после каждых 30 дней культивирования.
Полученные 
конгломераты микропобегов для дополнительной 
дифференциации и подращивания пересаживали на среду, содержащей 
половинное 
содержание 
фитогормонов, 
для 
дополнительного 
побегообразования. В последующих пассажах микропобеги высотой более 5 
мм отделяли от конгломерата и высаживали по одному в пробирки, на без 
гормональную среду MS, для подращивания. Для дополнительного 
размножения сформированных пробирочных растений арбуза проводили их 
клональное микроразмножение и депонирование путем черенкования на 
агаризированной безгормональной питательной среде MS. 
Сформированные растения-регенеранты с хорошо развитыми листьями 
высаживали в пробирки на питательную среду MS, модифицированное 
ауксином ИУК, в концентрации 0,5 мг/л для индукции ризогенеза. Для 
дальнейшей селекционной работы использовали растения-регенеранты с 3 - 
7 листьями и 3 - 5 развитыми корнями. Первичную адаптацию растений 
проводили в течение 3 недель в условиях повышенной влажности воздуха (не 
менее 75%), при освещении 5 тыс. люкс, 16-часовой длине дня и температуре 
22 ° С.
При разработке регенерационной системы для размножения растений в 
культуре изолированных тканей и клеток 
invitro
определение первичного 
эксплантата является необходимым этапом. В ходе эксперимента 
подтверждена высокая морфогенная способность к индукции каллусогенеза и 
органогенеза семядольных эксплантатов арбуза. Через 2 недели 
культивирования семядолей на питательных средах на их поверхности 
начиналась индукция светло-зеленого первичного каллуса (рис. 1). 
Интенсивность его образования на различных вариантах сред зависела от их 
фитогормонального баланса (табл. 1). Особенностью семядольных 
эксплантатов была способность к формированию каллуса даже на 
безгормональной среде, что связано с высокой морфогенной способностью 
донорских тканей, которые в момент высадки на питательные среды 
находились на ювенильной фазе развития. 

---

214 
В вариантах культивирования эксплантатов на средах с низкими 
концентрациями БАП (0,5 мг/л) на семядолях наблюдался не высокий 
процент каллусогенеза. Введение в питательную среду ауксинов (вар. 3) 
позволило увеличить каллусогенез до 262,7 мм
3
. На варианте питательной 
среды МS, модифицированном 1 мг/л БАП при отсутствии эндогенных 
ауксинов каллусогенез характеризовался не высокими параметрами развития. 
В варианте 7 было зафиксировано существенное увеличение размеров 
каллуса на семядолях, до 542,8±61,7, что связано с дополнением среды 1 мг/л 
ИУК. Кроме того на этом варианте регенерация было зафиксировано у 15 %
каллусов. Формирование новообразований было зафиксировано через 3 
недели культивирования семядолей и происходило методом органогенеза. На 
поверхности каллусных тканей формировались темно - зеленые структуры, 
из которых при последующем культивировании образовывались растения-
регенеранты (рис. 2).